常用的滅菌方法有濕熱滅菌法、干熱滅菌法、氣體滅菌法、輻射滅菌法和過濾除菌法。可根據(jù)被滅菌物品的特性采用一種或多種方法組合滅菌。只要產(chǎn)品允許，應(yīng)盡可能選用最終滅菌法（即產(chǎn)品分裝至包裝容器后再滅菌）滅菌。若產(chǎn)品不適合采用最終滅菌法，可選用過濾除菌法或無菌生產(chǎn)工藝達(dá)到無菌保證要求，只要可能，應(yīng)對非最終滅菌的產(chǎn)品作補充性滅菌處理（如流通蒸汽滅菌）。

      常用的濕熱滅菌驗證:主要是對產(chǎn)品、滅菌設(shè)備和裝載方式的驗證。驗證活動包括：對照滅菌設(shè)備設(shè)計的滅菌參數(shù)來校核滅菌器的性能、建立某產(chǎn)品滅菌程序及裝載方式的有效性和重現(xiàn)性、估計滅菌過程中產(chǎn)品可能發(fā)生的變化。（濕熱滅菌 （118-134℃）——蒸汽、過熱水）。另一種常用的干熱滅菌驗證：主要用于內(nèi)包裝用的玻璃容器或金屬制品的滅菌和去熱源，所使用的滅菌程序應(yīng)通過驗證試驗。(干熱滅菌（160-320 ℃）——熱空氣 )。
      濕熱滅菌的目的是通過一系列驗證試驗提供足夠的數(shù)據(jù)和文件依據(jù)，從而找到最有效最合理的滅菌參數(shù)，并把已經(jīng)驗證過的飽和蒸汽滅菌設(shè)備和滅菌工藝參數(shù)應(yīng)用到產(chǎn)品生產(chǎn)的除菌過程中去，以證明用于藥品生產(chǎn)過程中的每一臺飽和蒸汽滅菌設(shè)備過程和滅菌效果具有可靠性和重現(xiàn)性。主要適用于能耐受高溫、高壓飽和蒸汽的產(chǎn)品。
      濕熱滅菌的原理是使微生物的蛋白質(zhì)及核酸變形導(dǎo)致其死亡。這種變形首先是分子中的氫鍵分裂，當(dāng)氫鍵斷裂時，蛋白質(zhì)及核酸內(nèi)部結(jié)構(gòu)被破壞，進(jìn)而喪失了原有功能。蛋白質(zhì)及核酸的這種變形可以是可逆的，也可以是不可逆的。雖然無所謂動能行結(jié)構(gòu)被破壞，若氫鍵破裂的數(shù)量未達(dá)到微生物死亡的臨界值，則其分子很可能恢復(fù)到它原有的形式，微生物就沒有被殺死。為有效地使蛋白質(zhì)變形，如采用高壓蒸汽滅菌時，就需要水蒸氣有足夠的溫度和持續(xù)時間，這對滅菌效果十分重要。高溫飽和水蒸氣可迅速使蛋白質(zhì)變形，在規(guī)定操作條件下，蛋白質(zhì)發(fā)生變形的過程即微生物死亡的過程，是可預(yù)見和重復(fù)的。微生物的滅活符合一級動力學(xué)方程，微生物死亡速率是微生物耐熱參數(shù)D和殺滅時間的函數(shù)。即在給定的時間下被滅活的微生物與仍然存活數(shù)成正比。
      濕熱滅菌工藝驗證時，應(yīng)進(jìn)行熱分布試驗、熱穿透試驗和生物指示劑驗證試驗。以確定滅菌柜空載及不同裝載時腔室中的熱分布狀況及可能存在的冷點；在空載條件下，確認(rèn)121℃時腔室各點的溫度差值應(yīng)<1℃；使用插入實際物品或模擬物品內(nèi)的溫度探頭，確認(rèn)滅菌柜在不同裝載時，最冷點物品的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時間（F。）達(dá)到設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)；用生物指示劑進(jìn)一步確認(rèn)在不同裝載時冷點處的滅菌物品達(dá)到無菌保證水平。本法常用的生物指示劑為嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子。
1、熱分布試驗的操作：
      空載狀態(tài)下的熱分布試驗：
①整個滅菌腔室內(nèi)的溫度探頭應(yīng)均勻分布，將水平和垂直區(qū)均覆蓋在內(nèi)；
②說明溫度探頭在腔室內(nèi)的數(shù)量及位置，并有圖示；
③在排水口處，在靠近設(shè)備本身的溫度傳感/控制器的位置，應(yīng)再放置一支探頭；
④在滅菌溫度穩(wěn)定期，各處溫度應(yīng)基本保持一致（如各點之間的溫度差在1℃范圍內(nèi)）；
⑤重復(fù)試驗至少3次，以證明在該工藝條件下的溫度均一性、重現(xiàn)性、并且與規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)相符；
⑥每種裝載方式下的熱分布試驗；
⑦在產(chǎn)品容器內(nèi)以及腔室均勻放置測溫探頭以確定在裝載狀態(tài)下升溫緩慢的位置。此試驗應(yīng)在最大和最小裝載方式下分別進(jìn)行。
       測定不同裝載方式對產(chǎn)品的熱力學(xué)效果的影響，通過實驗應(yīng)得到以下參數(shù)：
①保溫階段的最高和最低溫度（溫度范圍）及平均溫度；
②最小和最大F。值；
③保溫時間。復(fù)試驗裝載3次，以證明在該工藝條件下的溫度均一性、重現(xiàn)性、并且與規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)相符。
2、熱穿透試驗：
      通過在產(chǎn)品容器內(nèi)均勻分布測溫探頭以確定在滅菌時相應(yīng)裝載方式下的冷點。應(yīng)分別在最大和最小裝載方式下進(jìn)行此試驗，以確定不同裝載方式對被滅菌物品的熱力學(xué)效果的影響，通過實驗應(yīng)能獲得如下數(shù)據(jù)：
①各點間的最大和最低溫度（溫度范圍）；
②保溫階段各點的平均溫度、各點的最小及最大F。值、以及各點的保溫時間。
     通過熱穿透試驗應(yīng)達(dá)到以下目的：
①測試數(shù)據(jù)應(yīng)證明，在滅菌保溫階段整個腔室內(nèi)各容器?內(nèi)的溫度應(yīng)不超過士1℃，各容器內(nèi)溫度之間的最大溫差應(yīng)不超過2℃；
②根據(jù)滅菌參數(shù)確定合適的產(chǎn)品滅菌程序；
③至少連續(xù)運行3次，以確保設(shè)定滅菌程序的穩(wěn)定性和可靠性。
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